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3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine Liquid Substrate

MDL:
MFCD00007748
Molecular Formula:
Molecular Weight:
Alias:
單組分TMB過氧化物酶底物液
Product order:
Name Specifications Packing Price Delivery
3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine Liquid Substrate 組成:TMB,穩(wěn)定劑。 500ml RMB 748 Consulting service
3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine Liquid Substrate 組成:TMB,穩(wěn)定劑。 100ml RMB 198 Consulting service
3, 3′,5 ,5′-Tetramethylbenzidine Liquid Substrate 25ml RMB 66 Consulting service
Character:
3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (TMB)是一種過氧化物酶底物,用于ELISA 反應(yīng)。底物產(chǎn)生一種可溶性淡藍色的末端產(chǎn)物,可在370 或 655 nm在分光光度計上讀取。TMB反應(yīng)可以用2 M H2SO4 (產(chǎn)生黃色)終止,450 nm讀取。
   TMB又分可溶型和沉淀型。 可溶型:與HRP反應(yīng)形成可溶性藍褐色產(chǎn)物,適用于ELISA及其他通過液體反應(yīng)檢測HRP的應(yīng)用,與HRP反應(yīng)形成沉淀性藍褐色產(chǎn)物,一步即用型溶液,無需混合,方便快捷 。 沉淀型:適用于Western Blot及其免疫沉淀化學(xué)等,一步即用型溶液,無需混合,方便快捷 單組分TMB過氧化物酶底物正常情況下淡黃色、淡藍色或者是淡綠色。底物溶液在650nm時檢測OD值小于0.04
Quality Standard:
使用方法
使用之前,以超純水反復(fù)洗滌的適當(dāng)容器,倒出適量單組分TMB底物溶液,待溶液達到室溫即可使用。
加液:加完HRP結(jié)合物并溫育一定時間后,洗板3-5次,每孔加TMB底物100-150uL, 37°C溫育15-30分鐘。
終止(備選):加等體積的1N的HCl或者2N的H2SO4來終止反應(yīng)。酶標孔中反應(yīng)液從藍色變?yōu)辄S色。
讀數(shù):終止反應(yīng)后,30分鐘內(nèi)在450nm處讀數(shù)。不加終止液,顯色更加穩(wěn)定,可以在620-650nm處讀數(shù)。


注意:
降低底物強度:如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景和/或沉淀,表明TMB底物反應(yīng)過于強烈。為了避免產(chǎn)生沉淀,可以在加入終止液后馬上讀數(shù);另外,可以進一步稀釋一抗和 /或HRP結(jié)合物。為了降低非特異性背景顏色,推薦進一步降低一抗和/或HRP結(jié)合物的濃度,盡量避免降低底物濃度。動力學(xué)檢測:TMB單組分底物在與過氧化物酶反應(yīng)時產(chǎn)生一種藍色,可以在加底物后620-650nm處讀數(shù),不需終止反應(yīng)。


穩(wěn)定性:2-8°C條件下,大于18個月。
敏感性:相當(dāng)于顯色AB雙液,或高于。
組成:TMB,穩(wěn)定劑。

Storage:
保存:2-8°C,請勿冷凍。
用途  TMB因其靈敏度較高及無致癌性而得到廣泛應(yīng)用。單組分TMB過氧化物酶底物與辣根過氧化物酶連接物反應(yīng)時產(chǎn)生一種深藍色的產(chǎn)物,適用于定量以及定性分析的酶聯(lián)免疫分析當(dāng)中。
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