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Taq DNA Polymerase

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Taq DNA Polymerase 500u RMB 330 現(xiàn)貨
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產品簡介:本制品是94KD的耐熱的DNA聚合酶。是把Thermusaquaticus DNA Polymerase的基因?-過克隆轉化到大腸桿菌中進行表達后,分離提取而得到的。它與天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。該酶反應需Mg2+參與,它以雙鏈DNA為模板催化核苷酸從5’向3’末端形成雙鏈DNA。該酶同時具有5’→3’核酸外切酶活性。該產品主要用于DNA的PCR擴增,DNA測序,可以很好地擴增1kb的DNA片段。該產品主要包括酶、10×反應緩沖液與氯化鎂溶液。

單位定義:在74℃,30分鐘內,能夠吸收10mmol dNTP,形成酸性不溶性物質所需的酶量為一個活性單位。

酶儲存緩沖液B:50%甘油,20mM Tris-HCl(pH8.0),100mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5%Tween20和0.5%Nonidet P40。

配套試劑:

1.10×反應緩沖液(不含MgCl2): Taq DNA Polymerase 10 X Reaction buffer (without Mg2+)包含 500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100. 建議該緩沖液加入每種dNTP的最適濃度為0.2毫摩爾。

2.25mM MgCl2:反應中鎂離子在混合物中的最終濃度由使用者根據自己需要決定。建議使用濃度在1£-4毫摩爾。注:使用前完全溶解氯化鎂溶液并充分振蕩幾秒鐘。

3.10X反應緩沖液(含MgCl2):包含 15mM MgCl2,500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100. 建議該緩沖液加入每種dNTP的最適濃度為0.2毫摩爾。

注意:反復凍融可能會引起氯化鎂沉淀,將緩沖液在90℃加熱10分鐘能恢復溶液的均一性。

質量控制:

1. 活性:大于5單位/微升。

2. Overdigest (OD) 檢測: 30單位Taq DNA 聚合酶與1微克λDNA在74℃下反應16小時后,用瓊脂糖凝膠電泳未檢出降解的λDNA。

3. 切口酶檢測: 30單位Taq DNA 聚合酶與1微克超螺旋質粒DNA在74℃下反應4小時后,用瓊脂糖凝膠電泳未檢出切口酶或線性DNA帶。

4. 熱穩(wěn)定性檢測: 94℃時,每微升5單位Taq DNA 聚合酶在緩沖液中的半衰期長于1小時。

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